血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 3, Plasma (GPX3)

GSHPX3; GPx-P; GSHPx-P; GPXP; Plasma glutathione peroxidase; Extracellular glutathione peroxidase

  • 血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 产品包装(模拟)
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  • 血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 实验结果图
  • SEC992Mu.jpg 标准曲线图
  • Certificate 通过ISO 9001、ISO 13485质量体系认证

特异性

本试剂盒用于检测血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPX3),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制,不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。

回收率

分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPX3)(加标样品),重复测定并计算其均值,回收率为测定值与理论值的比率。

样本 回收率范围(%) 平均回收率(%)
serum(n=5) 95-103 99
EDTA plasma(n=5) 97-104 101
heparin plasma(n=5) 84-101 95

精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差: CV<10%
批间差: CV<12%

线性

在定值血清及血浆样本内加入适量的血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPX3),并倍比稀释成1:2,1:4,1:8,1:16的待测样本,线性范围即为稀释后样本中血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPX3)含量的测定值与理论值的比率。

样本 1:2 1:4 1:8 1:16
serum(n=5) 89-101% 83-105% 92-105% 80-90%
EDTA plasma(n=5) 87-95% 83-91% 92-101% 81-91%
heparin plasma(n=5) 78-102% 81-101% 78-103% 92-101%

稳定性

经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

实验流程

1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。

实验原理

将血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPX3)抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPX3)与连接于固相载体上的抗体结合,然后加入生物素化的血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPX3)抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP标记的亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPX3)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。

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参考文献

杂志 参考文献
Reproduction Alteration in the intrafollicular thiol–redox system in infertile women with endometriosis [Pubmed:25376627]
international journal of cardiology Endothelial function impairment in STEMI patients with out-of-hospital cardiac arrest under therapeutic hypothermia treatment. [pubmed:28087172]
Current Alzheimer Research Comparison of Extracellular and Intracellular Blood Compartments Highlights Redox Alterations in Alzheimer's and Mild Cognitive Impairment Patients. [pubmed:27748187]
Frontiers in Microbiology Burn Serum Increases Staphylococcus aureus Biofilm Formation via Oxidative Stress. [pubmed:28702016]
Clinical and Translational Oncology Hydrogen peroxide-induced mitophagy contributes to laryngeal cancer cells survival via the upregulation of FUNDC1 [Pubmed: 30284230]
Toxicological Sciences Kidney toxicity and response of selenium containing protein-glutathione peroxidase (Gpx3) to CdTe QDs on different levels [Pubmed: 30535317]
Available at SSRN 3234834 Human Plasma Protein (s) Based Conceptual Diagnostic Tool for Altitude-Acclimation Assessment []
The Journal of Nutritional Biochemistry Dietary selenium deficiency or selenomethionine excess drastically alters organ selenium contents without altering the expression of most selenoproteins in mice []
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ECOTOXICOLOGY AND ENVIRONMENTAL SAFETY In vivo and in vitro studies on inactivation of selenium containing protein-glutathione peroxidase 3 in mice nephrocytes caused by lead [Pubmed: 32678766]
Nat Immunol Selenium–GPX4 axis protects follicular helper T cells from ferroptosis [34413521]
Eberhard Karls University Experimental nephrotic syndrome in mice with an inducible deletion of podocin and the role of plasminogen in sodium retention []
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